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FDA对于血液相容性的额外要求-补体激活

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发表于 2022-8-29 16:36:05 | 显示全部楼层 |阅读模式
本文转载自 海河标测

补体激活试验简介

医疗器械/材料与血液接触后,可能激活血液中的补体系统,产生效应分子导致机体的严重急、慢性反应,同时影响医疗器械/材料的血液相容性。

No.1 哪类医疗器械需要进行补体检测?

由于补体系统分布在我们的血液系统中,补体激活依赖于表面接触。只有与血液发生直接接触的医疗器械需要进行补体激活测试。

No.2 补体与SC5b-9的关系?

补体存在于人和脊椎动物血清及组织液中,可介导免疫应答和炎症反应。在人体内,补体激活有三条不同的激活途径,下图可以看出,补体激活的三条途径具有共同的末端通路,即形成膜攻击复合物MAC(C5b-9)。补体激活的末端产物C5b-9与血清中的S蛋白形成一种亲水性的、无裂解细胞活性的大分子片段或无溶解细胞膜活性的大分子片段SC5b-9。通过检测SC5b-9分子的含量,可以反映出血清中补体系统的激活情况。

No.3 补体激活试验对照

▪ 阴性对照:推荐使用低密度聚乙烯;
▪ 阳性生物材料对照:采用天然乳胶手套,乳胶是一种高度激活补体的材料;
▪ 眼镜蛇毒因子阳性对照:是一种补体系统强激活物质,用于确定补体激活的最大作用;
▪ 标准人血清:用于激活补体的基线对照;
▪ LMCD对照:经过批准,或许可的,长期建立的,被认为是安全的医疗器械,与试验样品具有相似的设计,材料和临床使用并且在试验样品体外或体内安全评价作为参照样品。
No.4 医疗器械的补体激活的检测方法

常用的是使用酶联免疫的方法进行补体激活的检测。

将人血清加入预包被抗体的微孔板中,然后加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的SC5b-9的抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后TMB进行显色,最终在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅与血清中的SC5b-9的浓度成正比。用酶标450nm 测定OD值,通过标准曲线计算SC5b-9的浓度。

No.5 补体激活的结果判定

补体激活试验不同于其他实验,没有明确的接受准则。补体激活试验需要借助于LMCD组或者阴性组来辅助判定检测结果。采用统计学分析进行结果评价,利用T检验比较检测组和阴性对照组或者LMCD组是否具有显著性差异,根据统计分析结果来辅助判断检测样品的结果是否被接受。




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